Данное исследование используется для оценки состояния микрофлоры, а именно помогает исключить бактериальный вагиноз, изменение кислотности среды, ее защелачивание.
Метод Грама используется очень давно. Суть состоит в том, что приготовленные из полученного материала мазки нагревают, бактерии становятся нежизнеспособны и тем самым их стенка окрашивается в один из цветов. Грамположительные бактерии с толстой стенкой окрашиваются в фиолетовый цвет, а грамотрицательные - в розовый. Таким образом можно точно определить, какие бактерии преобладают в мазке.
В частности, такое исследование используют для определения количества полезной и условно-патогенной флоры, а также для выявления ключевых клеток.
Нормальная микрофлора влагалища и цервикального канала представлена лактобактериями и условно-патогенными микроорганизмами. Лактобактерии выполняют защитную функцию, создавая слабокислую среду в присутствии гликогена, что не допускает излишнего размножения условно-патогенных бактерий. Они же в свою очередь находятся в незначительном количестве, которое может повышаться на фоне снижения иммунитета, уменьшения концентрации лактобактерий, что приводит к развитию вагиноза. В частности, преобладающими микроорганизмами при вагинозе являются гарднерелла, мобилинкус. Учитывая последние данные о существовании особенных биопленок в биоценозе половых путей, данные бактерии обычно связаны и с другими условно-патогенными микроорганизмами.
Полученный материал из влагалища и цервикального канала в данном исследовании наносят на предметные стекла. В присутствии специальных красителей, после нагревания и фиксации спиртом, оценивают количество фиолетовых и розовых частиц. Лактобактерии выглядят как длинные большие палочки фиолетового цвета, так как являются грамположительными. Условно-патогенная флора, а именно гарднерелла и бактериоиды, а также мобилинкус, представляют собой мелкие кокки и палочки розового цвета, так как являются грамотрицательными.
Дополнительно происходит оценка наличия ключевых клеток. Данные образования являются маркерами вагиноза, так как представляют собой клетки эпителия с расположенными на них гарднереллами. Таким образом форма клетки меняется, поверхность ее становится шероховатой и обращает на себя внимание при проведении исследования.
Оценка по шкале Ньюджента предполагает подсчет баллов, которые начисляются за каждый из критериев:
- Более 30 морфотипов;
- 5-30 морфотипов;
- 1-4 морфотип;
- 1 морфортип;
- Нет морфотипов.
Для всех трех представителей микрофлоры - лактобактерии, гарднерелла, мобилинкус - оценивают количество обнаруженных в мазке морфотипов и начисляют баллы.
|
Баллы
|
A Lactobacilli
|
B Gardnerella
|
C Mobiluncus
|
|
0
|
более 30 морфотипов
|
нет морфотипов
|
нет морфотипов
|
|
1
|
5 - 30 морфотипов
|
один морфотип
|
один морфотип
|
|
2
|
1-4 морфотипа
|
1-4 морфотипа
|
1-4 морфотипа
|
|
3
|
один морфотип
|
5 - 30 морфотипов
|
5 - 30 морфотипов
|
|
4
|
нет морфотипов
|
более 30 морфотипов
|
более 30 морфотипов
|
Количество полученных баллов суммируют (A+B+C)
Таким образом данное исследование является достаточно точным, так как во внимание принимают сразу несколько критериев, что снижает вероятность ошибки.